Microbiota cloacal aeróbia de cracídeos cativos no Rio Grande do Sul e sua susceptibilidade a antimicrobianos / Cloacal microbiota identification and evaluation of the antimicrobial resistance in captive cracids from Rio Grande do Sul, Brazil

Os cracídeos são aves silvestres que habitam as matas tropicais da América. Foram coletadas, no ano de 2007, amostras cloacais de 51 aves de dez espécies diferentes de cracídeos mantidos em cativeiros no Estado do Rio Grande do Sul. A partir dos swabs, colhidos assepticamente, foi realizado o isolamento e a caracterização bacteriana e o teste de susceptibilidade antimicrobiana dos isolados. Foram identificadas 93 cepas de bactérias. As bactérias mais frequentemente isoladas foram Escherichia coli, Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. Todas as amostras foram negativas para o isolamento de Salmonella spp. O resultado do teste de sensibilidade mostrou que dentre as 93 cepas isoladas, todas foram sensíveis apenas ao imipinem. Adicionalmente, os menores percentuais de resistência foram observados frente ao cloranfenicol e ciprofloxacina. Os gêneros e espécies bacterianas com maior percentual de resistência a diferentes antibióticos testados foram Escherichia coli, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus e Streptococcus spp. Com os resultados obtidos no presente trabalho, concluí-se, que a população de cracídeos estudada apresenta sua microbiota cloacal composta por vários gêneros e espécies bacterianas e que a multirresistencia pode ser um problema no futuro, uma vez que algumas cepas isoladas mostraram percentuais elevados de resistência a diferente antimicrobianos.

Cracids are wildlife Galliformes which inhabits the America's tropical forests. Fifty one cloacal swabs were collected from 10 different species of captive cracids from the Rio Grande do Sul State during 2007. The cloacal swab samples were submitted to bacterial isolation, identification and, subsequently; antimicrobial susceptibility testing. Ninety three bacterial isolates were obtained from the cracid population examined. The most prevalent among the isolates were Escherichia coli, and bacteria from the Staphylococcus and Streptococcus genera. All samples tested in this study were negative for Salmonella spp. The antimicrobial susceptibility tests showed that none of the 93 strains presented resistance to the antimicrobial imipinem. In addition, the lower percentages of resistance were observed against cloranfenicol and ciprofloxacine. The bacteria genus and species with the highest percentage of resistance to the different antimicrobials examined were E. coli, Serratia marcescens, Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. In conclusion, the data presented in this article demonstrate that the cloacal microbiota of the reported cracid population is composed of several bacterial genera and species and multi-drug resistance may be a problem for the future, since some strains showed elevated percentage of resistance against several different antimicrobials.

Anticorpos contra vírus de galinha em cracídeos / Detection of antibodies against commercial poultry viruses in cracids

Os cracídeos são Galliformes silvestres das Américas. Com o objetivo de investigar a presença de anticorpos contra vírus de galinhas em cracídeos, foram coletadas 51 amostras de soro de 10 diferentes espécies dessas aves. Esses animais eram mantidos em criatórios conservacionistas e zoológicos nos Municípios de Santa Maria, Soledade, Passo Fundo, Sapucaia, Gravataí, Viamão e Três Coroas, Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Anticorpos neutralizantes foram detectados em 5,9 por cento (3/51) do total de amostras testadas contra o vírus da bronquite infecciosa das galinhas, 15,7 por cento (8/51) contra o reovírus aviário e 35,3 por cento (18/51) contra o vírus da doença infecciosa da bolsa. Todas as amostras foram negativas para o vírus da bouba aviária no teste de IDGA. A detecção de anticorpos para vírus de aves comerciais sugere que os cracídeos podem ser susceptíveis à infecção por esses vírus.

The cracids are wild Galliformes native from the Americas. Fifty one serum samples were collected from individuals of 10 different species of cracids in order to obtain information regarding to the antibody status of different viruses. These birds were kept in shelters and zoos localized in Santa Maria, Soledade, Passo Fundo, Sapucaia, Gravataí, Viamão and Três Coroas counties, in the Rio Grande do Sul State, Brazil. Neutralizing antibodies were detected in the individuals serum from different species specific referring to infectious bronchitis virus in 5.9 percent (3/51) of the samples, to avian reovirus in 15.7 percent (8/51) and, to infectious bursal disease virus in 35.3 percent (18/51). All samples were negative for fowlpox virus, as measured by IDGA test. The detection of commercial poultry viruses antibodies suggests that cracids could be susceptible to infection by those viruses.

Anticorpos contra vírus em galinhas de terreiro do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Antibodies against avian viruses in backyard poultry from the Rio Grande do Sul State, Brazil

No Brasil, a população de aves conhecida como galinhas de terreiro encontra-se fora do sistema de biosseguridade aplicada às criações comerciais. Para investigar a presença de anticorpos contra alguns vírus específicos nesta população, foram coletadas amostras de sangue de 867 aves não-vacinadas em 60 propriedades de 22 municípios do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. O soro foi testado para a presença de anticorpos contra o vírus da bronquite infecciosa das galinhas (IBV), reovírus aviário (ARV) e o vírus da doença infecciosa da bolsa (IBDV) pela técnica de soroneutralização. Anticorpos contra IBV foram detectados em 65 por cento (564/867) das amostras, contra ARV em 21,6 por cento (187/867) e contra IBDV em 80,2 por cento (695/867) das aves. Todas as propriedades avaliadas apresentavam uma ave positiva para anticorpos contra IBV e IBDV e 88,3 por cento delas eram positivas para ARV. Os resultados demonstram que esses vírus estão presentes em galinhas de terreiro nas criações avícolas não-industriais da região central do Estado. Os resultados indicam a necessidade de um programa de vigilância permanente nessa população e ainda indicam a necessidade de avaliar o impacto destas infecções nos próprios plantéis e o risco associado à transmissão destas às criações comerciais.

The backyard poultry are not included in the biosecurity system applied in commercial flocks in Brazil. To investigate the presence of antibodies to specific viral pathogens in this population, blood samples were collected from 867 non-vaccinated birds, from 60 flocks in 22 counties of the Rio Grande do Sul State, Brazil. The samples were tested to detect antibodies against infectious bronchitis virus (IBV), avian reovirus (ARV) and infectious bursal disease virus (IBDV), through the virus neutralization test. Antibodies to IBV were detected in 65 percent (564/867), against ARV in 21.6 percent (187/867), and against IBDV in 80.2 percent (695/867) of the samples. All the flocks had chickens positive to IBV and IBDV antibodies, and 88.3 percent of them harbored antibodies to ARV. The results show the presence of these viruses in backyard poultry from the central region of the State. It also indicates the need for additional studies aimed to evaluate the real importance of these infections for this type of flocks.

Controle da infecção por Salmonella Enteritidis em frangos de corte com ácidos orgânicos e mananoligossacarídeo / Control of the infection caused by Salmonella Enteritidis with organic acids and mannanoligosaccharide in broiler

O objetivo deste estudo foi avaliar a ação de dois ácidos orgânicos (ácido fórmico e ácido propiônico) e de um mananoligossacarídeo (MOS) adicionados à dieta no controle da infecção intestinal por Salmonella Enteritidis (SE) em frangos de corte. Neste estudo de 39 dias, foram utilizadas 150 aves, de um dia de idade, da linhagem Cobb, lote misto, livre de SE, divididas em seis tratamentos (T) com 25 animais cada, em que: T1 (ausência de infecção), T2 (ácidos orgânicos e ausência de infecção), T3 (ácidos orgânicos + MOS e ausência de infecção), T4 (ácidos orgânicos e infecção com SE), T5 (ácidos orgânicos + MOS e infecção com SE) e T6 (infecção com SE). No 4º dia após o alojamento, a cama foi instilada com SE e a cada sete dias cinco aves por grupo foram submetidas à eutanásia por deslocamento cervical e necropsiadas. Depois foram realizados exames bacteriológicos para SE nesses animais, utilizando fezes coletadas sobre a cama de maravalha dos grupos e das tonsilas cecais dos animais necropsiados. No 18º dia, somente 60 por cento das aves estavam infectadas nos tratamentos T4 e T5; no 25º dia, 40 por cento das aves no T4 e 20 por cento no T5 estavam infectadas; no 32º dia 100 por cento das amostras testadas foram negativas em ambos os tratamentos (T4 e T5). Constatou-se que o T6 foi 100 por cento positivo até o 32º dia e no 39º dia reduziu em 20 por cento o número de animais infectados. Dentro dos parâmetros de avaliação deste experimento, os ácidos orgânicos e o mananoligossacarídeo adicionados à dieta contribuíram para o controle da infecção por SE.

The objective of this study was to evaluate the effect of two organic acids (formic acid and propionic acid) and of one mannanoligosaccharide added to the diet to control the intestinal infection caused by Salmonella Enteritidis (SE) in broilers. In this study of 39 days 150 birds were used, with one day of age, of the Cobb lineage, both sexes and free of SE. They were divided in 6 different treatments (T) with 25 birds each, where: T1 (no infection), T2 (organic acids + no infection), T3 (organic acids + mannanoligosaccharide and no infection), T4 (organic acids and infection with SE) T5 (organic acids + mannanoligosaccharide + and infection with SE) T6 (infection with SE). After housing, the chicken litter was instilled on the 4th day with SE and every seven days, five birds from each group were euthanized through cervical dislocation. The necropsy was performed and also the bacteriological exams to detect SE, using the feces collected over the chicken litter of the groups, bacteriological analysis of the cecal tonsils was done as well. On the 18th day only 60 percent of birds were infected in treatments T4 and T5; on the 25th day, 40 percent of birds in T4 and 20 percent in the T5 were infected; on the 32nd day, 100 percent of tested samples were negative in both treatments. The T6 group was 100 percent positive until the 32nd day, but on the 39th day, it got reduced in 20 percent of the number of infected animals. In the experimental conditions of this study, the organic acids and the mannanoligosaccharide added to the diet contributed to control the infection caused by SE.

Condenações por síndrome ascítica em frangos abatidos sob inspeção federal entre 2002 e 2006 no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Ascitic condemnations in broilers slaughtered under Federal Inspection between 2002 and 2006 in Rio Grande do Sul, Brazil

A ocorrência de condenação total de carcaças de frangos devido à síndrome ascítica (SA) em matadouros sob inspeção federal, no Estado do Rio Grande do Sul, alcançou a soma de 1.605.439 unidades no período compreendido entre 2002 e 2006, chegando a 8,19 por cento do total de condenações do período, sem aproveitamento parcial, conforme dados obtidos junto ao Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento (MAPA). Este trabalho teve como objetivos discutir e apresentar as causas e formas de controle da SA, bem como avaliar a evolução da ocorrência deste transtorno metabólico, uma vez que, em 2002, a síndrome ascítica representou 6,4 por cento do total de condenações, crescendo gradativamente até 2006, quando a ascite representou, até o mês de novembro, 9,6 por cento das condenações de carcaça total. A regressão linear apresentou uma forte correlação (0.92), demonstrando que os casos de condenações por ascite estão aumentando gradualmente. Os prejuízos advindos destas condenações, durante o período avaliado, geram valores na ordem de R$ 3,6 milhões, o equivalente a US$1,7 milhões. Esses dados demonstram a importância de maior controle e do monitoramento da enfermidade para o setor avícola.

The occurrence of broiler carcass condemnation due to ascitic syndrome (AS) in slaughterhouses under federal inspection in Rio Grande do Sul reached the sum of 1.605.439 units between 2002 and 2006, coming to 8.19 percent of total condemnations. There was no partial advantage during this period according to Brazilian agriculture authorities (MAPA). This research aimed to discuss and introduce causes and ways to control AS and evaluate the occurrence of this metabolic disease. In 2002 the AS was responsible for 6.4 percent of total commendation, growing gradually until 2006, where ascitic represented, until November, 9.6 percent of total carcass commendation. The linear regression showed a strong correlation (0.92), demonstrating that commendations due to ascites are growing gradually. During this period the damage caused by these commendations resulted in R$ 3.6 million losses (equivalent to US$ 1.7 millions). These results demonstrate the importance of more effectiveness control of this disease for the poultry industry.

Prevalência de cisticercose bovina em animais abatidos em frigoríficos de inspeção estadual no Rio Grande do Sul / Prevalence of bovine cysticercosis in slaughtered animals in cold state inspection in Rio Grande do Sul

Este trabalho tem como objetivo, determinar a prevalência de cisticercose bovina em animais abatidos em frigoríficos de Inspeção Estadual do RS. Conscientizar a população de que a erradicação da cisticercose só será possível após serem tomadas sérias medidas preventivas como inspeção sanitária, mudanças de hábitos alimentares, adoção de políticas de melhoramentos de infra-estrutura. Os dados foram obtidos de abates realizados no RS entre 1992 e 2001 fornecidos pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento através da Delegacia Federal do RS.

Eletroforese das proteínas plasmáticas em emas (Rhea americana) de diferentes faixas etárias / Eletrophoretic plasma protein profile in rhea (Rhea americana) of different age groups

A rheacultura vem crescendo em todo o Brasil. Porém, ainda há uma escassez de informações sobre esta espécie e de médicos veterinários especializados na área. Este trabalho teve como objetivo verificar as diferenças existentes na eletroforese plasmática (gel de agarose) em idades distintas de emas (Rhea americana). Utilizaram-se 45 emas, separadas em quatro grupos: grupo 1 (n=10), animais com 15 dias de idade; grupo 2 (n=10), animais com 30 dias; grupo 3 (n=10), animais com 45 dias e grupo 4 (n=15), animais com 1 ano. Verificou-se homogeneidade nos valores eletroforéticos analisados nas aves dentro de cada faixa etária. Houve diferença entre grupos etários em valores de proteína plasmática total, albumina, globulinas e relação albumina/globulinas. Também houve diferença entre grupos para as frações alfa1, alfa2, ß e gama. Os resultados encontrados demonstram que o perfil eletroforético de emas sofre variações conforme a idade analisada. Dessa forma, exige-se maior atenção por parte do médico veterinário quanto à interpretação desse tipo de exame conforme a idade da ave. Os parâmetros obtidos neste estudo indicam divergência de valores quando comparados com os de outras espécies aviárias, evidenciando a importância de se conhecer tais valores nesta espécie.

Breeding of rheas has been growing throughout Brazil. However, there is still lack of information about this species and of professionals specialized in the area. This study was aimed at verifing the differences in plasmatic electrophoresis (agarosis gel) at different ages of rheas (Rhea americana). Fourty-five rheas were separated into 4 groups: group 1: (n=10), 15 day old animals; group 2: (n=10), 30 day old animals; group 3: (n=10), 45 day old animals; group 4: (n=15), 1 year old animals. The electrophoretic values analyzed presented homogeneity within each age group. There were differences between different age groups in the values of total plasmatic protein, albumin, globulins and the albumin/globulin relation. There was also a difference between age groups for fractions alpha1, alpha2, ß and gamma. These results demonstrated that the electrophoretic profile of rheas undergoes variations according to the age analyzed. Therefore, more attention, is needed by the professionals in the interpretation of this type of examination. The parameters obtained from this study show a divergence of values, when compared to from those obtained from other avian species, showing up the importance of understanding these values in this species.

Macroscopia, histopatologia e bacteriologia de fígados de frangos (Gallus gallus) condenados no abate / Gross, microscopic and bacteriologic evaluations of broiler chicken livers (Gallus gallus) condemned at slaughter

Este trabalho avaliou, através da macroscopia, histopatologia e bacteriologia, fígados de frangos (Gallus gallus) condenados no abate. Cem fígados de frango foram coletados na linha de inspeção. Noventa deles tinham sido condenados por apresentarem alterações macroscópicas. Dez fígados não apresentavam alterações macroscópicas. As coletas foram feitas em dois abatedouros localizados no Estado do Rio Grande do Sul. No laboratório, fez-se detalhada descrição das alterações macroscópicas dos fígados condenados e exames histopatológicos e bacteriológicos complementares. Para a descrição macroscópica, os seguintes parâmetros foram avaliados: forma, coloração, tamanho, consistência, odor e presença de lesões visíveis. Foram observados fígados com alterações na cor, forma, tamanho e/ou consistência em 47/90 amostras; fígados marrom-pálidos e com outras alterações macroscópicas associadas perfizeram 19/90 amostras; 5/90 fígados estavam amarelos ou amarelados e com outras alterações macroscópicas associadas; 19/90 fígados estavam verdes ou esverdeados e com outras alterações macroscópicas associadas. Os principais diagnósticos histopatológicos foram de colângio-hepatite heterofílica multifocal, degeneração e/ou necrose hepatocelular centrolobular e em ponte, hepatite necrosante aleatória, pericolangite heterofílica multifocal e peri-hepatite fibrinosa subaguda difusa acentuada. A bacteriologia foi direcionada para pesquisa de Escherichia coli, Salmonella spp. e Staphylococcus sp. Utilizando-se cultivo direto das amostras de fígado em meios de cultura seletivos, isolou-se E. coli em 26/100 amostras e Staphylococcus sp. em 24/100 amostras. Para pesquisa de salmonelas, utilizou-se a metodologia convencional preconizada para esta bactéria, entretanto não houve isolamento de nenhuma espécie deste gênero. Através das avaliações realizadas pode-se confirmar o predomínio de lesões sugestivas de infecção bacteriana nos fígados condenados.

Cryptosporidium sp. em intestinos, bursa de Fabricius e traquéia de frangos (Gallus gallus sp) / Cryptosporidium sp. in intestines, bursa of Fabricius and poultry trachea (Gallus gallus sp)

Parasitas do gênero Cryptosporidium infectam várias espécies de animais, e a enfermidade resultante é a criptosporidiose, importante zoonose de distribuição mundial. Em aves, a infecção tem sido reportada em várias espécies. Este trabalho objetivou identificar a presença do parasita em 208 amostras de bursa de Fabricius, 208 amostras de intestino e 208 de traquéia, coletadas de frangos (Gallus gallus sp) de diferentes idades, abatidos em três propriedades rurais do município de Santa Maria, RS. Foram feitas três impressões de cada amostra em lâminas para microscopia, coradas pelas técnicas de Ziehl Neelsen modificada com Dimetil Sulfóxido (DMSO), Ziehl Neelsen modificada por Henriksen e Pohlens (HP), Ziehl Neelsen (ZN) e Kinyoun (K), perfazendo 1872 impressões analisadas em microscopia óptica (1000 x). Neste total, nas diferentes colorações empregadas, oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados em 18 impressões de traquéia, 42 de bursa de Fabricius e 29 de intestino, resultando positivas, portanto, 89 impressões. Destas, 44 foram identificadas pela técnica de DMSO, 32 por HP, três por ZN e 10 por K. Pode-se concluir que os oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados com maior freqüência nas impressões de bursa de Fabricius, e que o método de coloração, dentre os utilizados, que proporcionou a maior visualização dos oocistos foi o DMSO.

Megabacteriose em emas (Rhea americana) no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Megabacteriosis in Rhea americana in the State of Rio Grande do Sul, Brazil

Com o objetivo de avaliar as causas de mortalidade de filhotes de ema de uma propriedade, pesquisou-se megabactéria em esfregaços de moelas de oito emas, corados pelo método de Gram, associado a exame histopatológico. Os exames foram positivos para megabactéria em quatro emas. A confirmação de megabacteriose em emas no Rio Grande do Sul é de grande importância, pois a enfermidade pode gerar grandes perdas econômicas. Salienta-se a necessidade de maiores investigações nos diferentes criatórios, tendo em vista a elevada mortalidade inicial dos filhotes relatada pelos criadores, podendo ser a megabacteriose uma das causas.

Prevalência de anticorpos para Toxoplasma gondii em emas (Rhea americana) em diferentes criatórios do Estado do Rio Grande do Sul / Toxoplasma gondii antibodies prevalence in Rhea americana from several farms of Rio Grande do Sul State

Neste trabalho foram analisados 74 amostras de soro de emas provenientes de dez criatórios diferentes localizados no Estado do Rio Grande do Sul. O exame sorológico realizado foi hemaglutinação indireta, de acordo com as normas preconizadas pelo fabricante do Kit utilizado, para detecção e quantificação de anticorpos contra Toxoplasma gondii. A titulação mínima considerada foi a diluição maior ou igual a 1/8. A análise dos resultados demonstrou que uma pequena quantidade (8,10 por cento) destes animais estava infectada pelo parasita, no entanto 40 por cento das propriedades onde as amostras foram obtidas apresentaram animais reagentes. Esses resultados salientam a importância de um estudo mais aprofundado sobre a susceptibilidade imunológica destas ratitas ao agente da toxoplasmose.

Análise da contaminaçäo por Salmonella em ovos do tipo colonial através da reaçäo em cadeia da polimerase / Analysis of Salmonella in free-range eggs through polymerase chain reaction

A identificaçäo de poedeiras comerciais infectadas por salmonelas tem sido um dos pontos fortes da profilaxia e conseqüente reduçäo de surtos de salmonelose em humanos associados ao consumo de ovos, sendo que a análise dos ovos pode ser mais um dos pontos de detecçäo da infecçäo, que, muitas vezes, cursa sem sinais clínicos. A Reaçäo em Cadeia da Polimerase (PCR) parece ser uma estratégia útil para detecçäo de Salmonella, pois vários autores têm utilizado a PCR para verificar a presença da bactéria em carnes, fezes, tecidos, sangue, leite e ovos, com diferentes metodologias de manipulaçäo das amostras. Foram analisados 360 ovos, procedentes de dez propriedades rurais, produtoras de ovos tipo colonial, no distrito de Camobi, em Santa Maria - RS. Os ovos foram divididos em grupos de seis, totalizando sessenta amostras. O exame bacteriológico foi realizado conforme metodologia preconizada pelas normas técnicas e a metodologia de extraçäo de DNA pelo fenol-clorofórmio. A PCR foi realizada para a amplificaçäo de um fragmento de DNA de 284 pb. A análise dos resultados näo demonstrou diferença significativa entre a PCR, sendo que essa última detectou duas amostras a mais, devido a sua alta sensibilidade e especificidade, especialmente quando é sabido que os ovos apresentam uma populaçäo microbiana mista que, muitas vezes, impede o isolamento adequado das salmonelas no bacteriológico pela competiçäo com a flora bacteriana normalmente presente.

Salmonella enteritidis isoladas de amostras clínicas de humanos e de alimentos envolvidos em episódios de toxinfecções alimentares, ocorridas entre 1995 e 1996, no estado do Rio Grande do Sul / Evaluation of different kinds of food involved in FPOs caused by SE in the Southern Brazilian State of Rio Grande do Sul, during the years of 1995 and 1996

Os casos de toxinfecções alimentares produzidos por Salmonella têm aumentado significativamente durante as últimas duas décadas, em todo o mundo, principalmente devido ao sorovar Enteritidis (SE). Entretanto, a real ocorrência das salmoneloses não é conhecida, uma vez que a maioria dos casos de gastroenterites transcorre sem a necessidade de hospitalizações e sem o isolamento do agente causal no alimento incriminado. Entre a população, no entanto, existe a idéia generalizada de que os alimentos preparados com produtos de origem aviária são a principal fonte da bactéria. Neste contexto, embora as aves sejam reconhecidamente reservatórios de Salmonella, outras fontes potenciais do microrganismo devem ser consideradas. Assim, buscou-se avaliar os diferentes tipos de alimentos envolvidos em episódios de toxinfecções alimentares causados por Salmonella enteritidis, no Rio Grande do Sul, entre os anos de 1995 e 1996, bem como o papel dos manipuladores de alimentos na manutenção da cadeia desta infecção.

Avaliação da reação em cadeia da polimerase na análise de ovos, saladas de batata e maioneses, envolvidos em surtos de toxinfecção alimentar / Evaluation of the chain reaction of the polimerase in eggs, mayonnaise and potato salads involved in food toxinfection booms

O consumo médio de ovos no Brasil foi de apenas 94 unidades/habitante/ ano, em 2000, enquanto em outros países esse valor é três vezes maior. Acredita-se que o pouco consumo de ovos em nosso país esteja associado a restrições relacionadas a fatores culturais, estéticos e de saúde como colesterol elevado e presença de contaminantes. A incidência de surtos de intoxicações alimentares por salmonelas em diversos países chamou a atenção para fontes comuns de infecção. As investigações epidemiológicas identificaram o consumo de ovos ou alimentos com eles, como responsáveis pela maioria dos surtos. A metodologia oficial de diagnóstico das salmonelas nos alimentos, envolve cinco fases que demandam muita manipulação, com cerca de 96 horas para que se conclua pela bactéria com ainda a necessidade da tipificação sorológica. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) é rápida e eficaz, dependendo apenas de métodos de extração do material genético e para a retirada de substâncias que possam interferir na técnica. Avaliou-se a técnica da PCR em ovos, maionese e saladas de batatas envolvidas em surtos de toxinfecção alimentar em comparação com a metodologia bacteriológica convencional. Os resultados obtidos demonstraram a recuperação de 12/30 pelo bacteriológico, 14/30 pela PCR com extração pelo Tratamento Térmico e 17/30 com a extração pelo Fenol-Clorofórmio. O aumento da recuperação, aliado ao menor tempo de execução, variando de 30 horas até 54 horas, conforme a metodologia de pré-enriquecimento da amostra e a metodologia de extração utilizadas, são pontos favoráveis à indicação do uso da PCR no diagnóstico de rotina das salmonelas presentes em ovos e derivados.

Avaliação microbiológica da superfície de mãos dos funcionários do restaurante universitário, da Universidade Federal de Santa Maria, RS / Microbiological evaluation from the surface of the employee's hands of Universidade Federal de Santa Maria's restaurant, RS

A superfície das mãos pode apresentar grande número de microorganismos patogênicos ou não, e quando não há uma adequada higienização, durante a manipulação de alimentos podem contaminá-los com microorganismos capazes de acarretar inúmeras enfermidades ao homem. Sabe-se que na pele, existe uma flora microbiana potencialmente infecciosa e se calcula que a camada cutânea do homem é totalmente descamada a cada 48 horas, sendo então, esta descamação um fator importante de contaminação. Os alimentos consumidos pelo homem, tanto os de origem vegetal como os de origem animal, podem ser contaminados por microorganismos, durante qualquer uma das etapas de produção, manipulação, transporte, armazenamento ou distribuição. Teve por objetivo verificar a presença de microorganismos contaminantes nas mãos dos manipuladores de alimentos do Restaurante Universitário da Universidade Federal de Santa Maria, RS. Foi feita a pesquisa de número de bactérias totais, coliformes fecais, presença de Staphylococcus aureus e Salmonella sp. Nas amostras coletadas em 1996 obteve-se 100 por cento de positividade exceto para Salmonella sp, em 1997, 85 por cento, e em 1998 22,22 por cento. Esta relativa diminuição da contaminação só foi conseguida quando foram tomadas providências em relação à educação sanitária dos manipuladores. Estes dados comprovam que se obteve melhoria de qualidade e diminuição do risco de contaminação dos alimentos pelas mãos dos manipuladores, mas não descartam a necessidade contínua de treinamentos e controle de riscos.

Avaliaçäo parasitológica da alface (Lactuca sativa) consumida "in natura" no restaurante da Universidade Federal de Santa Maria, RS / Enteroparasite evaluation of lettuce consumed in natura in the restaurant at Universidade Federal de Santa Maria, RS

No Brasil ainda säo poucos os trabalhos que tem avaliado a contaminaçäo de verduras por parasitas causadores de enfermidades intestinais no homem. No período de 1995 à 1999, se investigou as condiçöes higiênico-sanitárias de verduras (Alface-Lactuca sativa) consumidas "in natura" no Restaurante Universitário da Universidade Federal de Santa Maria, RS. Nas amostras de hortaliças consumidas no Restaurante Universitário, até o ano de 1996, haviam altos índices de contaminaçäo por ovos e oocistos de enteroparasitas e a partir do ano de 1997 os índices se reduziram a 100 por cento das amostras negativas. E se mantêm desta forma, devido a trabalhos de educaçäo sanitária e mudança da metodologia de higienizaçäo das verduras. Evidenciou a importância das verduras na transmissäo de agentes causadores de diversas enfermidades parasitárias para o homem, comprovando que existe a contaminaçäo de verduras por material fecal, tanto de origem animal quanto humana, e que é necessário se manter vigilância sobre estes produtos que säo consumidos "in natura".

Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of Salmonella in artificially inoculated chicken meat

The aim of this study was to develop a polymerase chain reaction (PCR) protocol for the detection of Salmonella in artificially contaminated chicken meat. Tests were performed with different dilutions of Salmonella Typhimurium or Salmonella Enteritidis cells (10-7, 10-8 or 10-9 CFU/mL) inoculated in chicken meat samples, in order to establish the limits of detection, incubation times (0, 6, 8 and 24 hours of pre-enrichment in PBW 1 percent) and three DNA extraction protocols (phenol-chloroform, thermal treatment and thermal treatment and Sephaglass). The assay was able to detect until 10-9 CFU/mL of initial dilution of Salmonella cells inoculated in chicken meat, which allows detection of Salmonella within 48 hours, including 24 hours of pre-enrichment and using the phenol-chloroform DNA extraction protocol. As the results are obtained in a shorter time period than that of microbiological culture, this procedure will be useful in the methodology for detection of Salmonella in chicken

Métodos de extraçäo de DNA para a detecçäo de Salmonella em ovos de galinhas, com e sem casca, através da reaçäo em cadeia pela polimerase / DNA extraction methods for Salmonella detection in chicken eggs, inshel and outshel, by polimerase chain reaction

O diagnóstico microbiológico de Salmonella sp em amostras de alimentos é demorado, com cinco diferentes etapas, levando cerca de 120 horas até o resultado final. A utilizaçäo da técnica da Reaçäo em Cadeia pela Polimerase (PCR) pode diminuir esse período, porém sofre influência de substâncias presentes na amostra que afetam a reaçäo. O objetivo deste trabalho foi comparar dois métodos de extraçäo de DNA, a extraçäo por tratamento térmico e a pelo fenol-clorofórmio, em amostras de 100 ovos de galinhas domésticas artificialmente contaminados com uma cepa de Salmonella enterica sorovar typhimurium em fase estacionária. O material obtido com as extraçöes foi submetido à PCR, utilizando-se um par de iniciadores que amplificam um fragmento de 284pb do gene InvA de Salmonella sp. Comparando os métodos de extraçäo, observou-se uma diferença na capacidade de detecçäo de 12 por cento a favor do método do fenol-clorofórnio, quando a extraçäo foi realizada a partir do ovo com casca. No momento em que a mesma metodologia foi usada apenas com a parte interna dos ovos, essa diferença subiu para 26 por cento o que foi significativo (P<0,003), demonstrando que a metologia de extraçäo foi determinante para melhorar a sensibilidade da técnica. No entanto, ao comparar-se a percentagem de positivos independente da técnica de extraçäo do DNA, observou-se diferença significativa (P<0,047) a favor das amostras de ovos sem casca. Isso sugere que para a detecçäo de Salmonella por PCR deve-se utilizar apenas a parte interna dos ovos, pois a casca pode determinar interferência na técnica.

Detecçäo de Salmonella sp em ovos de galinhas através da reaçäo em cadeia pela polimerase-PCR / Detection of Salmonella in chicken eggs through the techinique of PCR

Estimativas brasileiras citam 34.000 pessoas anualmente envolvidas em surtos de toxinfecçöes alimentares causadas por Salmonella sp. Com freqüência säo indicados como fonte de infecçäo ovos ou produtos derivados como cremes, maionese e clara batida fresca. Tendo em vista dificuldades de confirmaçäo da presença destes microrganismos nestes alimentos, buscam-se alternativas de diagnóstico, entre elas a utilizaçäo da Biologia Molecular. Através da reaçäo em cadeia pela polimerase (PCR), utilizando-se um par de oligonucleotídios que amplifica um fragmento de 284 pares de bases do gene invA (gene relacionado com a capacidade de invasäo das salmonelas), foi possível detectar a presença destas em ovos SPF contaminados experimentalmente com uma amostra de Salmonella Typhimurium que foi coletada a partir de um cultivo em meio BHI, na fase estacionária, diluída até 0,00000001 e inoculada em ovos de galinha inteiros e apenas na parte interna. Vinte e cinco gramas de ovos contaminados foram incubados a 42§C com 225 ml de água peptonada a 1 por cento. Para a extraçäo de DNA e a realizaçäo da PCR coletou-se 1ml de cada amostra, em diferentes tempos de incubaçäo em água peptonada a 1 por cento e em caldo Rappaport-Vassiliadis. As metodologias de extraçäo obedecereram protocolo do fenol-clorofórmio e pelo tratamento térmico. Obteve-se 100 por cento de recuperaçäo nas amostras com 24 horas de incubaçäo em água peptonada a 1 por cento, o mesmo acontencendo com 24 horas de caldo RV, independentemente do inóculo inicial.